NHP AV Shunt Thrombosis: Aliran, Trombus & Pendarahan - Berita

AV shunt thrombosis dalam NHP: mentafsir aliran, trombus dan titik akhir pendarahan

Jumlah bekuan yang dipulihkan pada penghujung kajian trombosis shunt arteriovenous (AV) adalah satu bacaan antara beberapa. Dalam amodel shunt AV primat bukan manusia (NHP)., darah mengalir melalui segmen ujian extracorporeal yang ditentukan di bawah aliran. Persediaan menyokong penilaian kelakuan aliran dan pembentukan trombus pada permukaan yang bersentuhan dengan darah, dan titik akhir hemostasis pelengkap menerangkan bahagian keselamatan tindak balas antitrombotik.

non-human primate NHP arteriovenous shunt thrombosis

Pengukuran ini menjawab soalan yang berbeza. Aliran menunjukkan sama ada trombus yang sedang berkembang menjejaskan patensi. Beban trombus menerangkan bahan yang didepositkan pada atau dalam segmen ujian.Pendarahan dan hemostasislangkah menunjukkan sama ada perencatan trombosis datang dengan kesan yang berlebihan pada hemostasis normal. Tiada titik akhir tunggal meliputi ketiga-tiga dimensi farmakologi.

Perkara yang diukur oleh model AV shunt

Model trombosis shunt AVletakkan peranti ujian atau segmen cantuman dalam litar yang mendedahkannya kepada darah yang mengalir. Sentuhan dengan permukaan asing, geometri tempatan dan medan aliran yang terhasil memulakan lekatan dan pengaktifan platelet, pembekuan dan pembentukan fibrin. Keseimbangan antara proses ini bergantung pada artikel ujian, bahan permukaan, geometri peranti dan keadaan hemodinamik, serta keadaan hematologi asas haiwan.

Kerja sejarah membuktikan kebolehlaksanaan mengukur pembentukan trombus dalam monyet rhesus menggunakan alat ujian yang terdedah kepada darah dalam arterioarterial atau arteriovenous shunt. Dalam satu kajian, trombus yang didepositkan semasa pendedahan yang ditentukan dikira secara gravimetrik; geometri peranti dan bahan mempengaruhi jumlah yang dipulihkan, dan penyiasat melaporkan lebih banyak aliran yang boleh diramal dalam AV berbanding konfigurasi arterioarteri.[1] Kajian berkaitan menggunakan model untuk membandingkanagen antitrombotikdan gabungan pengukuran trombus gravimetrik dengan penilaian ultrastruktur.[2] Kajian ini memberikan bukti prinsip, bukan protokol siap sedia atau julat rujukan universal untuk kajian NHP kontemporari.

Anggap model sebagai cabaran trombogenik akut yang terkawal yang dibina di sekeliling aliran darah dan permukaan yang bersentuhan dengan darah yang jelas. Ia tidak menghasilkan semula setiap ciri trombosis arteri atau vena spontan pada pesakit. Titik akhir bekuan yang berkaitan dengan peranti tidak boleh dibaca sebagai proksi langsung untuk pecah plak, tromboembolisme vena, strok, infarksi miokardium atau kegagalan graf klinikal.

NHP AV shunt thrombosis endpoints

Tiga domain titik akhir, dan sebab domain tersebut harus kekal berbeza

1. Patensi aliran dan shunt

Aliran ialah bacaan berfungsi interaksi yang berkembang antara trombus dan litar ujian. Bergantung pada reka bentuk kajian, ringkasan berguna termasuk garis dasar dan profil aliran bersiri, perubahan daripada garis dasar, aliran mengikut masa atau masa kepada pengurangan atau gangguan aliran yang telah ditetapkan. Jika aliran dipantau secara berterusan, data menunjukkan apabila perubahan bermula dan sama ada ia dikekalkan, maklumat yang tidak dapat diberikan oleh pengukuran terminal sahaja.

Aliran mesti ditafsirkan berhubung dengan sistem pengukuran. Peletakan probe, rintangan litar, dimensi peranti, keadaan tekanan, suhu dan gangguan teknikal menjejaskan isyarat yang dirakam. Protokol harus mentakrifkan julat garis dasar yang boleh diterima, cara artifak isyarat dikendalikan dan apa yang membentuk pengurangan aliran yang boleh ditafsir sebelum kumpulan rawatan dibandingkan. "Masa untuk oklusi" hanya bermakna apabila ambang dan tetingkap pemerhatian ditetapkan dan model boleh mencapai peristiwa itu di bawah keadaan yang dipilih.

Jisim trombus yang lebih rendah tidak membuktikan bahawa aliran terpelihara, dan aliran terpelihara tidak membuktikan bahawa sedikit trombus terbentuk. Deposit bukan oklusif terkumpul tanpa perubahan aliran mendadak; deposit yang terletak di strategik menjejaskan aliran walaupun jumlah jisim yang sederhana. Beban aliran dan trombus adalah titik akhir pelengkap, dan kedua-duanya tidak menggantikan yang lain.

2. Beban dan komposisi trombus

Penilaian trombus terminal mengukur bahan yang terbentuk pada atau dalam segmen ujian. Pengukuran gravimetrik ialah pendekatan langsung dan mantap dalam kesusasteraan primata sejarah, tetapi hasilnya bergantung pada pemulihan, pengendalian dan penimbangan yang standard. Protokol harus menyatakan sama ada titik akhir yang diukur adalah jisim basah atau diproses, cara darah sisa ditangani dan sama ada keputusan dinormalkan kepada ciri peranti yang berkaitan seperti kawasan terdedah atau tempoh pendedahan. Pilihan ini mesti konsisten merentas kumpulan dan dilaporkan dengan cara yang sama.

Jisim sahaja tidak mendedahkan kandungan trombus atau bagaimana ia terbentuk. Jika dibenarkan secara saintifik, pengimejan atau mikroskop dan penilaian yang disasarkan bagi komponen platelet dan fibrin menambah konteks mekanistik. Analisis sedemikian membantu membezakan perubahan dalam pemendapan keseluruhan daripada perubahan dalam sumbangan relatif bahan kaya platelet dan kaya fibrin. Tentukan kaedah, lokasi persampelan dan pendekatan pemarkahan terlebih dahulu, dan layan bacaan morfologi penerokaan sebagai penerokaan sehingga ia layak.

Set titik akhir yang berguna memautkan pemerhatian dalam litar kepada spesimen yang dipulihkan: trajektori aliran semasa pendedahan, jumlah trombus pada titik akhir dan, jika disertakan, pencirian komposisi trombus. Urutan itu memberikan bacaan yang lebih lengkap daripada berat terminal tunggal.

3. Pendarahan dan hemostasis

Aktiviti antitrombotik dannyakesan pada hemostasistergolong dalam analisis yang sama. Kajian biasanya menggandingkan pemerhatian klinikal mengenai pendarahan, penilaian akses atau tapak prosedur, ukuran pendarahan yang ditetapkan protokol, dan data makmal atau farmakodinamik yang berkaitan dengan mekanisme ubat. Panel yang tepat mengikuti artikel ujian dan soalan kajian dan bukannya templat yang disalin daripada spesies lain atau kelas farmakologi.

Masa pendarahan, apabila digunakan, adalah ukuran yang bergantung kepada konteks yang dipengaruhi oleh kaedah dan pelaksanaan; ia bukan anggaran langsung risiko pendarahan klinikal. Begitu juga, ujian pembekuan rutin, kiraan platelet atau ujian fungsi platelet setiap menangkap hanya sebahagian daripada hemostasis dan tidak sama sensitif kepada setiap mekanisme. Tafsiran lebih kukuh apabila pemerhatian dipasangkan dengan data pendedahan dan farmakodinamik, seperti koagulasi yang berkaitan atau ujian laluan platelet, dan bukannya menganggap sebarang keputusan makmal tunggal sebagai kesimpulan keselamatan yang lengkap.

Titik akhir pendarahan juga memerlukan pendekatan piawai dan akebajikan haiwansemakan dalam NHP. Protokol harus menyatakan bagaimana peristiwa diperhatikan dan digredkan, tempoh pemerhatian yang berkaitan, kriteria untuk susulan atau intervensi, dan cara pendarahan prosedur dibezakan daripada isyarat berkaitan dadah. Penemuan trombosis berkurangan tanpa pendarahan yang dikesan dalam kajian kecil tidak menyokong tuntutan "tiada risiko pendarahan."

Bina pakej titik akhir di sekitar soalan farmakologi

Pemilihan titik akhir mengikut keputusan yang dimaksudkan. Program antiplatelet biasanya memerlukan pemendapan atau fungsi platelet, aliran, dan penilaian hemostasis. Program antikoagulan menghidupkan farmakodinamik dan pendedahan laluan koagulasi, yang menyebabkan perubahan dalam pembentukan trombus boleh ditafsirkan. Peranti pengubahsuaian permukaan memberi penekanan pada pemendapan khusus bahan dan pencirian permukaan. Dalam setiap kes, titik akhir menjejak kembali ke mekanisme tindakan dan ke had model.

the principle of an NHP arteriovenous AV shunt thrombosis model

Kajian AV shunt yang koheren biasanya menjajarkan empat aliran maklumat:

Respons fungsional:tingkah laku aliran dan sebarang patensi atau ukuran penyumbatan yang telah ditetapkan.
Tindak balas trombus:jumlah yang didepositkan, dengan komposisi atau morfologi dinilai apabila dibenarkan.
Farmakologi:pendedahan artikel ujian dan ukuran farmakodinamik yang berkaitan dengan mekanisme pada titik masa yang boleh ditafsir.
Konteks hemostatik:pemerhatian pendarahan klinikal dan makmal atau langkah kefungsian terpilih yang sesuai dengan calon.

Pelan analisis harus mengenal pasti titik akhir utama dan membezakannya daripada langkah sokongan atau penerokaan. Rawak, penilaian buta jika boleh, keadaan kawalan,justifikasi saiz sampeldan pengendalian pratakrif kegagalan teknikal mengurangkan ketidakpastian tafsiran. Di mana pendedahan berulang atau perbandingan dalam haiwan dipertimbangkan, reka bentuk mesti mengambil kira pemindahan, pembersihan dan kebolehubahan biologi titik akhir yang dipilih.

Sumber kebolehubahan yang mengubah keputusan

Keputusan trombosis shunt AV adalah khusus untuk konfigurasi eksperimen. Bahan dan geometri peranti, luas permukaan terdedah, dimensi litar, keadaan aliran, tempoh pendedahan dan pengurusan peri-prosedur semuanya mempengaruhi pembentukan trombus. Faktor biologi, termasuk kiraan dan fungsi platelet, hematokrit, status pembekuan, spesies, kebolehubahan individu dan ubat bersamaan, juga mempengaruhi tindak balas.

Faktor-faktor ini bukan sekadar butiran teknikal. Jika mereka berbeza merentasi kumpulan atau tempoh belajar, mereka mengubah kesan rawatan yang jelas. Hematologi garis dasar, penyediaan dan pengendalian peranti yang konsisten, pengukuran aliran yang ditentukur, penyeragaman prosedur dan dokumentasi lengkap adalah sebahagian daripada kesahan titik akhir. Protokol juga harus menentukan bagaimana gangguan aliran yang tidak dijangka, kegagalan peranti atau pembentukan trombus yang tidak mencukupi akan direkodkan dan dirawat dalam analisis.

Konteks NHP menambah nilai apabila kajian memerlukan penilaian bersepadu dalam vivo terhadap pendedahan, farmakologi dan tindak balas hemostatik dalam primata. Ia tidak menghapuskan keperluan untuk kelayakan model. Kajian rhesus sejarah menunjukkan bahawa AV shunt menyokong kajian penjanaan trombus dan kesan antitrombotik, tetapi mereka tidak menetapkan bahawa hasil pemindahan tidak berubah kepada spesies lain, konfigurasi peranti, kelas kompaun atau tetapan kajian kontemporari.[1,2]

four information streams can be interpreted together in an NHP AV shunt thrombosis study

Tafsiran terjemahan: profil risiko manfaat

Kesimpulan bahawa calon "mengurangkan trombosis" mengatakan sedikit dengan sendirinya. Persoalannya ialah sama ada pengurangan itu muncul dalam aliran, dalam beban trombus, atau dalam kedua-duanya; sama ada ia mengesan pendedahan dadah dan mekanisme farmakodinamik yang dijangkakan; dan perkara yang ditunjukkan oleh data hemostasis pada julat pendedahan yang sama. Percanggahan antara titik akhir adalah bermaklumat, dan biasanya mencerminkan perbezaan dalam kepekaan, pemasaan, lokasi atau mekanisme bekuan dan bukannya percubaan yang gagal.

Model trombosis shunt NHP AV menyumbang kepada penilaian praklinikal farmakologi antitrombotik apabila konfigurasi dan titik akhirnya dipadankan dengan keputusan yang ada. Kekuatannya terletak pada membawa aliran, trombus berkaitan peranti dan farmakologi sistemik ke dalam satu konteks eksperimen. Hadnya sama pentingnya: ia adalah model akut, bergantung kepada konfigurasi dan tidak boleh sahaja mewujudkan keberkesanan klinikal, risiko pendarahan klinikal atau faedah terapeutik dalam populasi pesakit tertentu.

Untuk pasukan translasi, keutamaan praktikal adalah untuk mentakrifkan soalan terlebih dahulu, kemudian pilih titik akhir aliran, titik akhir trombus dan pakej hemostasis yang direka untuk dibaca bersama. Penjajaran itu, bukan bilangan ukuran, menentukan sama ada kajian itu menghasilkan bukti yang berkaitan dengan keputusan.

Soalan lazim

S: Apakah ukuran model trombosis shunt NHP AV?

J: Ia menilai pembentukan trombus pada atau dalam segmen ujian yang menyentuh darah yang ditentukan di bawah aliran dalam NHP. Bergantung pada protokol, titik akhir termasuk gelagat aliran, beban trombus pulih, komposisi trombus, pendedahan ubat, aktiviti farmakodinamik dan kesan hemostatik.

S: Mengapa mengukur aliran serta jisim trombus?

A: Aliran menerangkan patensi berfungsi semasa percubaan, manakala jisim trombus mengukur bahan termendap pada titik akhir pengumpulan. Langkah-langkah ini berkaitan tetapi tidak boleh ditukar ganti: trombus kadangkala terkumpul tanpa oklusi, dan gumpalan kecil yang terletak di strategik menjejaskan aliran secara tidak seimbang.

S: Adakah beban trombus yang lebih rendah bermakna risiko pendarahan yang lebih rendah?

J: Tidak. Keberkesanan antitrombotik dan pendarahan adalah domain farmakologi berkaitan yang mesti diukur secara berasingan. Kajian harus merangkumi penilaian hemostasis yang sesuai dengan mekanisme, dan pengurangan beban trombus sahaja tidak mewujudkan ketiadaan risiko pendarahan klinikal.

S: Bolehkah keputusan AV shunt meramalkan hasil trombosis klinikal?

J: Mereka menyediakan bukti praklinikal tentang aktiviti antitrombotik dalam konfigurasi peranti dan aliran yang ditentukan. Mereka tidak, dengan sendirinya, meramalkan hasil klinikal atau menghasilkan semula semua mekanisme trombosis arteri atau vena spontan.

Rujukan

Mason RG, Wolf RH, Zucker WH, Shinoda BA.Model shunt vaskular primata bukan manusia untuk penjanaan trombus.Penyiasatan Makmal. 1976;34(6):558-564.PMID PubMed: 819713.
Mason RG, Wolf RH, Zucker WH, Shinoda BA, Mohammad SF.Kesan agen antitrombotik dinilai dalam model shunt vaskular primata bukan manusia.American Journal of Pathology. 1976.PMID PubMed: 820202; teks penuh.