Analisis cecair serebrospinal (CSF) ialah alat yang berkuasa untuk meningkatkan pengesanan pelbagai proses yang berlaku dalam sistem saraf pusat, seperti pendarahan, keradangan, jangkitan, tumor, dan keadaan klinikal lain. Selain itu, penilaian bersiri sebatian dalam CSF (seperti hormon, ubat, neurotransmitter, biomarker, metabolit dan virus) adalah sama penting dalam penyelidikan asas dan translasi. Isipadu CSF dalam sistem saraf pusat dikekalkan stabil melalui rembesan dan penyerapan.
I. Pertimbangan Operasi
CSF biasanya dikumpulkan melalui ventrikel serebrum atau tusukan lumbar. Tusukan lumbar membawa risiko komplikasi yang agak rendah dalam-primata bukan manusia kerana, dalam kebanyakan spesies, tapak tusukan lumbar adalah jauh dari hujung saraf tunjang. Teknik anestesia dan aseptik yang betul, termasuk penyediaan tapak seperti bercukur, dan penggunaan bahan steril, adalah perlu. Sekurang-kurangnya sarung tangan steril, picagari, dan jarum harus digunakan, dengan pertimbangan untuk langsir pembedahan steril. Pengumpulan CSF biasanya dilakukan dalam keadaan baring lateral, baring sternum, atau posisi duduk, meningkatkan akses ke ventrikel serebrum atau membesarkan ruang intervertebral melalui fleksi leher atau tulang belakang. Saiz dan panjang jarum yang dipilih hendaklah sesuai untuk spesies dan saiz primata bukan{6}}manusia. Teknik, peralatan, bahan habis pakai yang digunakan semasa prosedur, dan penjagaan perioperatif berbeza-beza bergantung pada spesies, objektif penyelidikan, dan keutamaan doktor haiwan klinikal.
Sesetengah protokol penyelidikan mungkin memerlukan pengumpulan CSF berterusan dari semasa ke semasa atau pengumpulan sampel CSF daripada subjek yang tidak dinestesi. Untuk protokol ini, pengumpulan CSF berterusan daripada monyet rhesus terjaga boleh dicapai melalui-kateter CSF implan jangka panjang yang disambungkan ke port pengumpulan subkutan.
Penulis telah berusaha sedaya upaya untuk mencari rujukan terkini mengenai jumlah volum CSF, had atau cadangan untuk tusukan dural, kekerapan pengumpulan, volum pengeluaran selamat dan kadar penambahan CSF. Kesusasteraan tentang aspek ini terhad untuk kebanyakan-primat bukan manusia. Selain itu, kaedah pengumpulan berbeza-beza, kerana tinjauan daripada ahli Persatuan Veterinar Bukan{3}}Manusia menunjukkan bahawa pelbagai institusi berjaya menggunakan kaedah yang berbeza untuk pengumpulan CSF. Oleh itu, penulis memberikan pertimbangan dan cadangan untuk pengumpulan CSF berdasarkan bukti terbaik sedia ada.
Sebagai rujukan, kajian terdahulu telah menentukan bahawa volum CSF jelas dalam monyet rhesus jantan dewasa (8.0-10.6 kg) ialah 10+/-0.06 mL, dengan kadar aliran CSF 0.018+/-0.003 mL/min. Kadar pembentukan CSF dalam monyet rhesus berkisar antara 28.6-44.2 μL/min. Kajian lanjut mengenai primata bukan manusia diperlukan dalam bidang ini untuk memudahkan pembangunan cadangan yang lebih instruktif.
II. Potensi Reaksi Buruk
Walaupun komplikasi semasa pengumpulan CSF dalam-primat bukan manusia jarang berlaku, variasi anatomi dan kaedah teknikal yang tidak betul atau tidak mencukupi boleh membawa kepada kerosakan atau komplikasi sampel seperti pendarahan, herniasi, jangkitan, kerosakan pada batang otak, saraf tunjang atau akar saraf dan ketidakselesaan haiwan. Walaupun komplikasi ini jarang berlaku, ia boleh menjejaskan kebajikan haiwan.
Disebabkan oleh risiko yang terlibat, CSF harus dikumpulkan oleh doktor haiwan atau kakitangan veterinar terlatih. Untuk percubaan yang tidak berjaya pada pengumpulan CSF, amalan mungkin berbeza-beza. Adalah menjadi amalan biasa untuk membenarkan sehingga tiga percubaan yang tidak berjaya oleh seorang individu. Selepas percubaan ketiga yang tidak berjaya, individu lain yang layak harus mengambil alih. Jika individu kedua tidak dapat mengumpul CSF selepas tiga percubaan, percubaan harus dihentikan. Sementara itu, haiwan itu akan menerima rawatan analgesik yang sesuai dan pulih daripada bius. Menukar tapak pengumpulan (cth, dari ventrikel serebrum ke lumbar) selepas percubaan yang tidak berjaya selalunya menghasilkan kejayaan. Jika percubaan yang gagal tanpa panduan pengimejan berlaku, penempatan jarum berbantukan fluoroskopi-boleh digunakan. Selain meningkatkan kadar kejayaan, panduan imej juga boleh mengurangkan kadar tusukan traumatik.
Pemantauan selepas pembedahan harus diteruskan sehingga haiwan itu kembali ke sangkarnya dan boleh mengekalkan postur tegak tanpa sokongan. Pemantauan haiwan hendaklah berlangsung sekurang-kurangnya 24 jam atau mengikut protokol yang diluluskan oleh Jawatankuasa Penjagaan dan Penggunaan Haiwan Institusi (IACUC). Pemantauan hendaklah merangkumi penilaian parameter asas fisiologi, tingkah laku dan lokomotor. Tanda-tanda disfungsi neurologi, termasuk tetapi tidak terhad kepada kelesuan, kemurungan, koma, dan tanda-tanda tekanan kepala, harus dinilai terutamanya. Sakit kepala dan akibat hipotensi intrakranial berikutan pengumpulan CSF bukanlah perkara biasa dalam perubatan manusia. Memandangkan kemungkinan komplikasi dalam primata bukan-manusia ini, rawatan analgesik hendaklah disediakan semasa pembedahan dan diteruskan selama 2-3 hari selepas pembedahan, atau mengikut keperluan berdasarkan pemerhatian selepas pembedahan yang berkaitan dengan tingkah laku yang berkaitan dengan sakit kepala atau sakit tulang belakang. Rejimen analgesik yang paling berkesan mungkin melibatkan rawatan komprehensif yang dimulakan sebelum pembedahan.
III. Pertimbangan IACUC dan Penyimpanan Rekod
IACUC harus biasa dengan prosedur yang berkaitan dengan pengumpulan CSF dan semua komplikasi yang berpotensi dan menyemaknya sekurang-kurangnya setiap tahun. Semua maklumat yang berkaitan, seperti dos ubat, persediaan praoperasi, volum CSF yang dikumpul, kekerapan pengumpulan dan pemulihan-jangka pendek dan panjang-jangka panjang, hendaklah diterangkan dalam protokol IACUC dan didokumenkan dengan sewajarnya dalam rekod perubatan atau log makmal.
Walaupun CSF mungkin data penting dalam protokol penyelidikan, teknik pengumpulan yang tidak betul boleh menjejaskan kebajikan haiwan. Apabila menyerahkan protokol, justifikasi saintifik untuk bilangan dan kekerapan pengumpulan harus disediakan. Secara khusus, IACUC harus menilai dengan teliti setiap cadangan yang melibatkan pengumpulan CSF dan mempertimbangkan perkara berikut:
1.Adakah pengumpulan CSF penting untuk mencapai objektif saintifik yang digariskan dalam protokol?
2. Adakah terdapat kaedah alternatif dan kaedah penilaian sistem saraf pusat yang kurang invasif (seperti teknik pengimejan) tersedia, dan jika ya, adakah ia telah dipertimbangkan?
3. Adakah pengendali mendapat latihan yang sesuai dan mempunyai kemahiran yang mencukupi?
4.Adakah anestesia perioperatif dan rejimen analgesik yang sesuai akan disediakan? Perundingan dengan doktor haiwan makmal perlu dicari mengenai pelan anestesia dan analgesik.
5.Adakah jumlah CSF yang dikumpul mempertimbangkan umur dan saiz haiwan?
6.Adakah bilangan dan kekerapan tusukan dural sesuai untuk haiwan itu, dan adakah risiko komplikasi telah diminimumkan? Jika berbilang koleksi CSF adalah sebahagian daripada kajian, masa pengumpulan maksimum untuk setiap haiwan harus dinyatakan.
7.Adakah pelan pemantauan selepas pembedahan sesuai?
8.Adakah semua kemungkinan komplikasi selepas pembedahan telah dipertimbangkan, dan adakah semua intervensi yang munasabah, termasuk euthanasia, telah disenaraikan?
